Hva er Cell Cycle Analysis?

May 6  by Eliza

Cellesyklus-analyse er en teknikk som brukes i biokjemisk forskning for å identifisere og analysere fasen av en biologisk celle. I løpet av sin levetid, passerer en celle gjennom en serie av sykliske faser som kollektivt er kjent som cellesyklusen. Mengden av deoksyribonukleinsyre (DNA) i cellen endres basert på fasen. I cellesyklusanalyse, blir cellens DNA farget med et fluorescerende fargestoff, slik at forskere til å bestemme hvor mye av DNA er tilstede, og hvor cellen er i sin syklus.

Cellesyklus består av to brede faser: inter og mitose. Interfase består av preparatet for divisjonen av cellen, eller mitose, som også kalles M-fasen. De fleste av cellens livssyklus er brukt på å forberede for mitose, som er kort i sammenligning, så inter er delt inn i tre deler: G1 fase, S fase og G2 fase.

I G1, er cellen i hovedsak opptatt av vekst. Under S-fasen, blir cellens genetisk informasjon i form av DNA replikeres i forberedelse for sin oppdeling i to datterceller. I G2, forbereder cellen for divisjon, som fører inn i M-fasen. Etter mitose, returnerer cellen til G1 i interfase, og syklusen begynner på nytt. Celler som av en eller annen grunn stopper dele forlater syklusen og eksisterer inert i det som er kjent som G0 fasen.

Cellen replikerer sitt DNA i S-fasen, slik at det er dobbelt så mye DNA i cellen under G2 og M enn det er i G1 eller G0. Forskere bruker denne informasjonen i cellesyklus analyse for å fastslå cellefasen. Cellesyklus analyse også kan avsløre unormalt i cellulær DNA.

Den teknikk som brukes i cellesyklusanalyse er kjent som strømningscytometri. Først blir et fluorescerende fargestoff som innføres i cellen som farger DNA-molekylene ved kjemisk binding til dem. Forskere deretter bruke et instrument som kalles en cytometer for å bestemme intensiteten av cellens fluorescens. En høyere fluorescens indikerer at mer fargestoff var i stand til å binde, og det viser at det er mer DNA i cellen.

Vanligvis er cellesyklusanalyse anvendt på en gruppering av cellene. En type diagram som kalles et histogram blir generert fra dataene, ofte viser to distinkte topper: en som viser populasjonen av celler i G1 fase, og en annen - dobbelt så høyt - som viser de i G2-fasen. G2 fase peak er dobbelt så høy fordi cellene i at befolkningen inneholde dobbelt så mye DNA som de i G1 topp. Celler som er i S-fasen, som fremdeles er i ferd med å replikere DNA, vises i diagrammet på et mellomliggende nivå mellom de to topper.

  • Stadier av mitose.
  • Mengden av DNA i cellen endres basert på cellens livssyklus.