Hva er en Biotin Antistoff?

March 2  by Eliza

I motsetning til hva man kanskje først tror, ​​er en biotin antistoff ikke et stoff som er reist mot biotin. Snarere er en biotin-antistoff et antistoff som er blitt konjugert til biotin. Biotin binder seg sterkt til en ligand - avidin - som kan, i sin tur, være konjugert til lys-detekterbare molekyler slik som fluoroforer. Biotin og avidin danner et av de sterkeste biologisk relevante kovalente bindinger kjente, noe som gjør biotin- og avidin-konjugert ligand / reseptor enheter spesielt nyttige i vitenskapelige studier.

Biotin er et B-kompleks vitamin - vitamin B7. Det er et lite molekyl som multiple biotin-molekylene kan være konjugert til et enkelt monoklonalt eller polyklonalt antistoff. Det faktum at biotin er også vannoppløselig gir større allsidighet i buffersystemer enn om den var uoppløselig. For større spesifisitet, er monoklonalt antistoff konjugering til biotin ofte anbefalt over polyklonale antistoff konjugering. Det biotin-molekyl kan være direkte bundet til antistoff av interesse, eller det kan være bundet via en molekyl hale for å tillate større bevegelsesfrihet.

Biotin ligand avidin er funnet i egg-albumin. Det kan være billig gjort og enkelt isolert. Flere avidin-molekyler vil binde seg til hver biotin-reseptoren, amplifisering av en enkelt antistoff-deteksjonssignal. Når en biotin antistoff holder et antigen av interesse, kan en eksperimentator deretter utsette komplekset til avidin konjugert til fluoroforene, noe som gjør det komplekse synlig. Gjennom fluorescent avbildning, kan den biotin-antistoff og avidin-konjugerte ligand påvises med lysmikroskopi, og antigener av interesse kan studeres in situ.

Selv om dannelsen og bruken av et biotin-antistoff og et fluorescerende merket avidin molekyl er en vanlig løsning for antigen gjenkjenning, alternativer finnes det fremdeles gjøre bruk av biotin / avidin-komplekset. Binding biotin til en ligand som en neurotoxin kan være fordelaktig i påvisning av plassering av neuronale reseptorer som påvirkes av neurotoxin aktuelle. Det er også mulig å bøye biotin til en nukleotidsekvens som messenger ribonukleinsyre (mRNA) for å finne hvor disse nukleotidsekvenser blir oversatt til proteiner, eller for å detektere cellulært mRNA regulering.

Det er mulig å kjøpe biotinylerte polyklonale eller monoklonale antistoffer, skjønt biotinylert antistoff-produksjon er innen evnen til mange forskere. Protokoller kan bli funnet på nettet tyder antistoff biotinylering metoder, selv om de fleste lett fulgt protokoller lenke direkte biotin til et antistoff i stedet foreslå hvordan du intercalate en molekylær spacer. Molekylmellomrom mellom biotin og dets tilhørende antistoff tillate større avstand for å eksponere flere molekyler til bindingssteder, og disse biotin-antistoffer vanligvis kjøpes i stedet for laget.

  • Biotin finnes i visse matvarer, for eksempel spinat.