Hva er en Confocal mikroskop?

February 14  by Eliza

En konfokal mikroskop er en spesiell form for fluorescerende mikroskop brukes til å oppnå høykvalitets 2D- og 3D-bilder. Med en basisk (bredt felt) fluorescerende mikroskop, lys av en bestemt bølgelengde, blir stråle på en prøve, og prøven absorberer noe av det lys og reflekterer resten av det ved en lengre bølgelengde. Jo lengre bølgelengde lys passerer gjennom et dikroisk speil, noe som tillater lengre bølgelengde lys, men ikke den opprinnelige (kortere) bølgelengde lys å passere igjennom. Den personen som viser eksempel ser bare det lys som har passert gjennom det dikroiske speilet. Grunnleggende fluorescerende mikroskoper fange både i fokus og ut av fokus, lys, som fungerer godt for store prøver der svært høy oppløsning ikke er nødvendig. Det fungerer ikke så godt for visning fine detaljer. En konfokal mikroskop er nødvendig for å fange høyoppløselige fluorescerende bilder.

Den konfokal mikroskop bruker et pinhole å avvise ute av fokus lys. I stedet for lys som passerer bare gjennom et dikroisk speil, blir lyset ført gjennom både et dikroisk speil, og et pinhole, hvilket innebærer at personen som viser eksempel ser bare et enkelt punkt av prøven. For å vise en hel prøve, bevegelige speil skanne lys på tvers av en rektangulær plan av prøven, og en datamaskin som samler lyset som prøven blir skannet. En fullstendig skanning vil resultere i en optisk skive eller tverrsnitt, av prøven. Denne type mikros kalles konfokal laser-skanning mikroskopi, delvis fordi en laser brukes som lyskilden.

Å lage et 3D-bilde, flere skanninger gjort, og skaper flere "skiver" av prøven, og en datamaskin kombinerer hver skive å lage et tredimensjonalt bilde. Mikroskopet kan programmeres til å variere avstanden mellom skivene, avhengig av hvor klar et 3D-bilde brukeren ønsker å oppnå. Mikroskopet kan også variere hastigheten som skanner det et bilde, med langsom skanning gi høyere oppløsning enn rask scanning.

Den konfokal mikroskop har blitt en veldig vanlig del av utstyret i mange livs laboratorier. De er kostbare, og noe stort, og ofte har rom som er dedikert til deres bruk, fordi rommet må være mørke for å oppnå et godt fluorescerende bilde. Selv konfokale mikroskop er mest brukt for å vise celler og strukturer i celler, kan de bli brukt til å oppnå et bilde av eventuelle tredimensjonale fluorescerende prøve, og blir noen ganger brukt til å vise halvledermaterialer.