Hva er en IHC antistoff?

September 7  by Eliza

En immunhistokjemisk (IHC) antistoff er et reagens som vanligvis anvendes i vitenskapelige studier for å tagge antigener av interesse. Et antigen er noe lite molekyl som kan forårsake en immunreaksjon som tvinger antistoffproduksjon mot at entall antigen. Basert på pattedyrs immunsystemet, er antistoffproduksjon et enkelt trinn i en prosess med å identifisere materiale som utenlandske, slik at kroppen kan deretter angripe og fordrive den invasiv stoff, enten det er et virus, en bakteriell infeksjon eller et lite molekyl som pollen.

Antistoffer kan ha enorm spesifisitet og bindende evne i tagging antigener. At spesifisitet utnyttes til fordel for forskere når antistoffproduksjon er rettet mot identifisering av spesifikke antigener av interesse. En tynn seksjon av vev kan være farget med et antistoff slik at experimenter lett kan identifisere alle antigen-områder som er tilstede i den prøven. Mange selskaper har spesialisert seg antistoff skapelse, forårsaker en enorm kollektiv antistoff katalogen skal være tilgjengelig for forskere og forskere.

En IHC-antistoff anvendes i forskjellige eksperimentelle teknikker. Antistoffarging i tynne seksjoner av vev innstøpt i parafin eller plast benyttes ofte slik at antigener kan finnes in situ. En IHC-antistoff kan også bli brukt i forsøks utfellingsteknikker slik som en ko-immunoutfelling analysen fokuserte på å bringe antigener ut av oppløsningen for å kvantifisere mengden av antigen som er til stede i et stort stykke vev. Analyser som måler mengden av lys som er i stand til å passere gjennom en vevskulturplate godt etter en supernatant er blitt utsatt for i bunnen av en brønn-pre-belagte IHC-antistoffet er også ofte brukt for å kvantifisere mengden av et antigen i en homogenisert vevsprøve.

Det er mulig å ha antistoffarging protokoller som er avhengige av bruken av en enkelt antistoff for antigen gjenkjenning. Disse protokollene vanligvis brukes på vevsprøver som er innebygget i et ikke-reaktivt substrat, og som er montert på en glass-slide. Disse enkelt antistoffarging prosedyrer er også populært i laboratorier som tag sine egne antistoffer med deteksjons molekyler som fluorophores.

Mer vanlig blir imidlertid antistoffarging protokollene krever bruk av primære og sekundære antistoffer. En primær IHC antistoffet er dannet mot et spesifikt antigen, som kan være usedvanlig undersøkt. Et sekundært antistoff IHC bli dannet mot det primære antistoff IHC. Det sekundære antistoff er merket, men til en identifiserende molekyl slik som biotin, eller en fluorofor. Denne to-antistoff-teknikk er vanlig fordi selskaper spare penger tilsetning av fluoroforer eller dyre tagging reagenser til store mengder av antistoffer dannet mot de immun markører av en bestemt art i stedet for merking av kostbare reagenser til et antistoff dannet mot et antigen som kan bli studert ved svært få forskere.

  • Forsiktige poster må holdes under immunolabeling slik at testen kan replikeres om nødvendig.