Hva er Fluorescent i Situ Hybridisering Technique?

Fluorescerende in situ hybridisering, også kjent som fluorescens in situ hybridisering, er mer ofte referert til som FISH. Det er en teknikk som innebærer anvendelse av en kort DNA-tråd som er merket med et fluorescent farvestoff for å påvise genetiske abnormiteter. FISH tillater etterforskere for å visualisere kromosomene, deler av kromosomer, eller spesifikke gener raskt og nøyaktig. Dette blir ofte benyttet for å bestemme prognosen for og behandling av visse sykdommer, spesielt cancer.

FISH brukes til å avgjøre om kromosomer har unormalt. Dette kan omfatte kromosomale strykninger, rearrangementer, eller translokasjoner, hvor to kromosomer har byttet segmenter. FISH tillater også etterforskere for å visualisere spesifikke gener. Det kan avgjøre om et bestemt gen er til stede, der den ligger på kromosomene, og hvis flere kopier er til stede. Dette kalles genkartlegging.

Den genetiske sammensetningen av en person som er inneholdt i sitt DNA, som er plassert i kjernen av alle sine celler. DNA har to tråder som er gratis til hverandre. Med andre ord, de molekyler som kalles basepar som svarer nøyaktig sammen. Gener er segmenter av DNA som har en bestemt sekvens av basepar og er lokalisert på bestemte områder av kromosomer. Gener arves og bestemmer hvordan cellene fungere, men de kan også bli mutert dersom sekvensen av DNA basepar endringer.

Den fluorescerende in situ hybridisering teknikk utnyttet gratis natur DNA-trådene. Etterforskerne først opprette en sonde. Dette er en kort, enkelt strand av DNA som er gratis for den genetiske sekvensen etterforskeren er på jakt etter. Proben blir deretter merket eller festet til et fluorescerende fargestoff.

Celler fra sykt vev, slik som en tumorbiopsi, vanligvis utgjør den prøve som skal undersøkes av fisk. Prøven blir oppvarmet for å denaturere DNA i kjernen av cellene. Dette betyr at de doble tråder av DNA i prøven cellene brytes opp for å danne enkelttråder. En spesifikk FISH probe blir deretter hybridisert med prøven. Med andre ord, er det probeâ € ™ s enkelt strand innført og sikringer med sin gratis enkelt strand i denaturert prøve celler.

Ved hjelp av en spesiell fluorescerende mikroskop, ser forsker ved prøven. Dersom det spesifikke gen eller kromosom er tilstede i prøven celler, vil den vises som et fluorescerende lys mot en mørkere bakgrunn. Forskere kan lett se om genet er til stede eller ikke, og hvis det er, hvor mange kopier av genet er i hver celle. Dersom forskeren er ute for plasseringen av et gen, kan han eller hun se hvor på kromosomet det er. En vanlig lysmikroskop, kan ikke brukes med fisk, fordi det fluorescerende fargestoff avgir et svært lavt nivå av lys.

Anvendelse av DNA-hybridisering med prober ble først oppnådd i 1960; imidlertid, ble prober merket med radioaktive stoffer i stedet for de fluorescerende. Dette hadde flere problemer. Radioaktive stoffer er ustabile, farlig, og krever spesielle protokoller for destruksjon. Det tar også lang tid for å måle den radioaktive signal som sendes ut fra den hybridiserte sonde. Den fluorescerende in situ hybridisering teknikk vinner de fleste av disse hindringene.

Hvis etterforskerne vet hva genet de er ute etter, er FISH rask og nøyaktig på å finne den. FISH kan også utføres selv om cellene er ikke aktivt å dele, og det gir mer spesifikk informasjon om unormalt i kromosomene. Andre konvensjonelle teknikker, slik som karotyping, bare fortelle søkere antallet og størrelsen av kromosomer i en celle.

Fluorescerende in situ hybridisering har ulemper. Siden nøkkelen til fisken kjenne basepar sekvens og / eller plassering av et gen, kan den ikke benyttes som en generell screening. Det er også dyrere enn andre, mindre spesifikke teknikker og er kanskje ikke tilgjengelig i alle laboratorier eller sykehus.

Fordelene og ulempene ved fluorescerende in situ hybridisering er best beskrevet ved eksempel. FISH er rutinemessig brukt i brystkreftdiagnose for å fastslå om en pasient har flere kopier av et gen kalt HER2. Dette betyr vanligvis en mer aggressiv form for brystkreft, og at pasienten bør få visse medisiner som en del av sin behandling. Fisk kan brukes til dette på grunn av baseparsekvens og kromosomal plassering av HER2-genet er kjent. I motsetning til dette, kan fisken ikke brukes til å bestemme hvilke ukjent gen eller gener har forårsaket brystkreft, eller for å screene for brystkreft generelt.

• Forske oss fluorescerende in situ hybridisering teknikk for å raskt og nøyaktig visualisere kromosomene, deler av kromosomer, eller spesifikke gener.
• DNA testes for genetiske feil i fluorescerende in situ hybridisering.
• Fisk er ofte benyttet for å bestemme prognosen av mange kreftformer.
• Celler fra sykt vev, slik som en tumorbiopsi, vanligvis utgjør den prøve som skal undersøkes av fisk.