Hva er rekombinant protein Produksjon?

February 1  by Eliza

Rekombinant proteinproduksjon er ekspresjon av proteiner som har blitt fremstilt ved rekombinante DNA-teknikker. Denne prosessen gjør det mulig for disse substansene som skal gjøres i store mengder. Slik masseproduksjon er gjort både for laboratoriestudie og for industriell produksjon.

Denne teknikk blir ofte brukt til å produsere humant veksthormon og insulin. Innhenting av menneskelig veksthormon gjennom rekombinant proteinproduksjon er en stor forbedring i forhold til å skaffe det fra kadavre fordi tilstedeværelsen av proteiner hentet fra kadavre tidvis resulterte i smitteoverføring. Å gjøre insulin på denne måten er også fordelaktig fordi den har aktivert varianter av insulin til å bli gjort som har forskjellige farmakologiske virkninger i kroppen.

Proteiner er kjeder av aminosyrer, kodet av DNA. De gener som koder for disse proteinene er satt inn i spesielle vektorer eller enheter av DNA. Vektorer som er valgt som vil produsere store mengder av det ønskede protein. Dette er kjent som overuttrykk.

Overekspresjon er gjort i spesielle vertsceller. Noen ganger vertene er bakterier eller gjær. I de tilfeller hvor proteinene er fra pattedyr, vertene er ofte insekt eller pattedyrcellelinjer. Et stort antall byggesett er kommersielt tilgjengelige for å lette både kloningen av genet, og den etterfølgende rekombinant proteinproduksjon.

Disse pakkene har spesielle vektorer kalt ekspresjonsvektorene som har en spesiell promoter å produsere store mengder protein. En promoter er den delen av DNA som styrer produksjonen av den gensekvens som følger den. Ofte kan disse ekspresjonsvektorer bli slått av, og er induserbar. Spesielt med bakterielle verter, som produserer for mye protein på en gang kan være giftig, hemme veksten av bakterier.

Det er flere forskjellige måter for å indusere ekspresjon. I begge bakteriene dyrket til en viss tetthet. Deretter enten en forbindelse blir tilsatt for induksjon, eller temperaturen skiftet til en ved hvilken promotoren er aktiv.

For å lette rensing av proteiner fra bakterier, blir kloning ofte utført slik at det er en kode på proteinet som binder til en matrise. Dette skiller proteinet fra cellerester. For eksempel vil en kode av histidin molekyler på protein bindes til en kolonne av nikkel. Når proteinet er bundet, er merkelappen avspaltes, slik at rent protein som deretter kan elueres fra kolonnen. Det kan ta år å rense et protein ved hjelp av tradisjonelle metoder.

En ekstra faktor å vurdere er om proteinet krever endring etter sin første produksjon. Dette er ofte tilfellet for pattedyr proteiner. Bakterier ofte ikke riktig modifisere slike proteiner, slik overekspresjon av disse mer avanserte proteinene er ofte utført i insekt eller pattedyrceller. En rekke bioteknologiske selskaper har spesialisert seg i å utføre rekombinant proteinproduksjon.

  • Insulin er et medikament som blir anvendt som et rekombinant humant protein.
  • Formlene for proteinsyntese er kodet i humant DNA.