Hva er RNA ekstraksjon?

November 21  by Eliza

Ribonukleinsyre (RNA) ekstraksjon er en laboratorieprosess som vanligvis anvendes i molekylærbiologisk forskning. Ved å isolere tilnærmingene av RNA, kan forskerne studere genetiske komponenter i en rekke organismer, fra bakterier til mennesker. Selv deoksyribonukleinsyre (DNA) er den mest vanlige nukleinsyre assosiert med genetisk forskning, er RNA forbindelsen mellom DNA og celle-proteiner som er ansvarlige for en rekke forskjellige strukturelle roller. Utvinning av RNA tillater forskere å studere veien fra DNA informasjon til proteinproduksjon og cellefunksjon.

Nukleinsyrer, i form av DNA og RNA, holder den genetiske informasjon som er nødvendig for celler å fungere og replikere. Ribonukleinsyre eller RNA, er koblingen mellom DNA og celleproteiner. Spesifikke typer RNA kopiere bestemte deler av DNA for å hjelpe til med dannelsen av slike proteiner. Følge stien mellom DNA og celle proteiner hjelper forskerne å forstå genregulering og proteinsyntese innen individuelle celler. Prosesser som fremmer RNA ekstraksjon og sikre prøve stabilitet gi forskere med et middel for å følge stien mellom DNA og RNA.

Under RNA-ekstraksjon, er biologiske prøver redusert og renset i en slik grad at RNA er isolert for senere undersøkelse. Molekylære komponenter, slik som proteiner, RNA og DNA, skillevegg eller isolere på forskjellige tidspunkter, slik at for utvinning av spesifikke typer av RNA. Ulike vev og celletyper krever ulike metoder for RNA ekstraksjon. Mens en rekke metoder finnes for å utføre RNA ekstraksjon, til den vanligste bruksområder sentrifuge blande biologiske prøver med ulike kjemiske forbindelser, kjent under samle denatureringsmidler.

En vanlig metode for RNA-ekstraksjon er fenol-kloroform-ekstraksjon, også kjent som PC eller PCIA. Ved hjelp av denne metoden, er vevsprøver blandet med like deler fenol og kloroform. Kjent som en bifasisk blanding blir oppløsningen sentrifugert i en denaturerende oppløsning. To faser resultere, med den første som den vandige fasen og den andre er den organiske fase. Det er i løpet av den vandige fase som RNA-ekstraksjon skjer, ved hjelp av etanolutfelling.

Andre fremgangsmåter for å ekstrahere RNA varierer, avhengig av prøvestørrelsen, vevstype, og enten helt eller delvis RNA er nødvendig. For gjær, plante, eller dyreprøver, komplett RNA, eller total eukaryote RNA, er prøvene trengs. Bakterier, på den annen side, krever total prokaryote RNA. Hver type RNA nødvendiggjør en annen metode for prøvepreparering, ekstraksjon, og lagring.

Komplikasjoner med RNA-ekstraksjon er vanlige og generelt relatert til degradering av RNA etter ekstraksjon. Ribonuklease enzymer som vanligvis finnes i vevsprøver forringer raskt RNA. Hvis det ikke brukes raskt, kan RNA degradering gjengi en prøve ubrukelig. Som svar, mange metoder for RNA ekstraksjon inkluderer skritt for utarbeidelse av prøver for lagring, både før og etter utvinning, for å redusere eller bremse nedbrytningen av RNA.