Hva er Western Blot antistoffer?

January 9  by Eliza

Western blot-antistoffer er store Y-formede proteiner, eller immunoglobuliner, produsert til bruk i Western blot immunanalyse, for å detektere et test en assosiert protein i en vevskultur. Mange selskaper har spesialisert seg på å produsere og gi antistoffer til laboratorier som bruker metoden Western blott. Det finnes to typer av Western blot antistoffer som kan produseres i laboratoriet: monoklonale og byclonal. Fremgangsmåten og type antistoff som produseres er avhengig av hvor antistoffet gjengir naturlig i vertskroppen. I Western blot-testing, er en prosess som kalles gel-elektroforese som brukes til å separere proteiner som er native til den vevsprøve fra målrettede Western blot-antistoffer, noe som fører til positiv identifikasjon.

Nesten en hvilken som helst substans kan brukes til å produsere et monoklonalt antistoff som vil binde seg til sitt tilhørende protein i et Western blot-kultur. Polyklonale antistoffer blir produsert i store deler av den samme måten, men prosessen er mer komplisert ved at antistoffene må høstes fra immun B-celle ressurser stedet for å være rett og slett klonet fra en overordnet celle. Den voksende teknologi for å produsere immunoglobulin fra varierte stoffer er ansett som et uvurderlig verktøy i biokjemi, molekylærbiologi, og medisin. Western blot analyse kan påvise proteiner assosiert med HIV, Lyme sykdom, og Creutzfeldt-Jakobs sykdom-Mad Cow sykdom-, noe som fører til legene å kunne foreta en endelig diagnose tidligere i løpet av sykdomsprogresjon. I tillegg til disse programmene, kan rettsmedisin også bruke Western blot antistoff teknologi for å identifisere blod eller annet stoff prøvene på et åsted.

Uavhengig av sitt program, starter prosessen med å identifisere en målrettet protein i en vevsprøve med gjengivelse av et kvantum av antistoffet fra en kjent kilde. Monoklonale antistoffer kan fremstilles av eksisterende kultur, men fremgangsmåten for å produsere polyklonale antistoffer som er betydelig mer tidkrevende. Prosessen innebærer vanligvis injisere et vertsdyr, som en mus eller geit, med enten inaktive eller levende partikler, noe som medførte at dyrets B-lymfocytter produserer immunglobuliner som er spesifikke for antigenet. Deretter blir rensemidler og buffere tilsettes prøven som vil hindre nedbrytning av immunglobuliner ved noen naturlige enzymer, og gelelektroforese blir brukt til å separere proteiner ved molekylvekt eller isoelektrisk ladning. Western blot-antistoffer er nå klar til å gjennomgå "blotting" -prosess, som er overføring av antistoffene til en membran samtidig å notere de spesifikke blot mønstre som produseres under overføringen som er unike for proteinet som blir identifisert.

  • Western blot antistoff teknologi kan brukes til å identifisere kriminalitet sceneprøver.