rekombinante antistoffer

Et rekombinant antistoff er et antistoff laget ved bruk av rekombinant DNA-teknologi ved å innføre et fragment av DNA inn i en gjær, virus eller bakterie. Den resulterende rekombinante organisme vil uttrykke antistoff, selv om det er fra en annen art. En forsker kan høste antistoffer for medisinsk eksperimentering og forskning. Det er også mulig å anvende dem ved fremstilling av farmasøytiske forbindelser for å behandle ulike sykdommer.

Rekombinant DNA-teknologi krever et laboratoriemiljø hvor forskere kan arbeide med en rekke forskjellige organismer og vektorer. Vektoren virker som en bærer for DNA av interesse. Forskeren kan velge den mest hensiktsmessige organisme og vektoren på grunnlag av det genetiske materialet og tidligere suksesser eller svikt. Hun setter nøye DNA inn i den av organismen til å tvinge den til å klone og uttrykke antistoffet. Med kontrollerte forhold, kan hun avle flere generasjoner av organismer som alle vil produsere rekombinant antistoff.

Noen vitenskapelige selskaper lager og selger rekombinante antistoffer. Forskere som ønsker å arbeide med dem, men ikke har teknologien til å lage dem kan plassere en ordre for en standard eller tilpasset produkt. Selskapet skal produsere organismene og sende et ferdig produkt til forskeren. Det kan også arbeide med en forsker som ønsker å utvikle en ny rekombinant antistoff eller som trenger et tilpasset produkt for en svært spesifikke behov.

Disse antistoffene kan være verdifull for grunnforskning samt farmasøytisk forskning og utvikling. Det kan være mulig å anvende rekombinante antigen-antistoff i screenings, for å identifisere reaktive antigener i en prøve. De kan også være nyttige for behandling av sykdom. En pasient kan ta en rekombinant antistoff for å bekjempe en organisme kroppen hennes kan ikke identifisere og isolere på egen hånd. Dette er en tilnærming til kreftbehandling, der pasientene tar medisiner som er rettet mot kreftceller og la resten alene.

Svært kontrollerte betingelser er nødvendige for rekombinant antistoffproduksjon. Forskeren må sørge for at DNA-fragmentet er ferdig og kommer fra den riktige delen av genomet. Hvis det er feil eller det er en feil i DNA, kan de resulterende antistoffer ikke være brukbare eller kunne oppføre seg uventet. Innføring av forurensninger kan også forårsake problemer med antistoffproduksjon, som organismer kan frembringe feil stoff eller kan ikke trives på grunn av en tilfeldig DNA-innsetting. Forskere rutinemessig teste utgang fra sine laboratorier for å bekrefte at det er ren og brukbare.

  • I noen tilfeller, medisinske forskere er i stand til å bruke rekombinant DNA for å behandle og kurere pasientens sykdom.

Rekombinant protein ekspresjon er fremstilling av et protein som stammer fra rekombinant DNA. Det er en vanlig teknikk i molekylærbiologi og i farmasøytisk produksjon av hormon erstatninger. Det rekombinante DNA-er en bestemt del av et gen utformet for å uttrykke et enkelt produkt i en vertscelle, styrt av spesielle kjemiske faktorer, slik at den rette proteinet uttrykkes i store mengder. Mange hormoner og enzymer som ble historisk avledet fra dyrekilder har nå syntetisert ved rekombinant proteinekspresjon, deretter høstet og raffinert fra vertsceller.

For å uttrykke rekombinante proteiner, må nøye utvalgte sekvenser av DNA innføres i en vert-genomet. Tar partier av den genetiske kode fra en organisme og plassere disse i cellekjernene til en annen er en form for kloning. Dette gjøres via innsettingen av en sekvens av rekombinant DNA som koder for det ønskede protein inn i kjernen, som utløser ekspresjon av genet ved å transkribere den inn i RNA. Rekombinante proteiner er sammenstilt når stykker av mRNA som bærer informasjon fra DNA migrere til ribosomene fra cellens kjerne, og det initiere produksjonen av et protein i henhold til en bestemt mal.

Vertsceller vil gjøre tilstrekkelige mengder av et rekombinant protein med mindre DNA innføres med egnede vektorer, slik at den rette genetiske informasjon vil bli uttrykt i tilstrekkelig mengde. Protein expression faktorer er de molekylære signaler som skal følge med rekombinant DNA som er satt inn i vertsceller for å sikre at målproteinet vil være over-uttrykt. Dette er den eneste måten rekombinant protein ekspresjon kan gjøre nok av en substans for farmasøytiske eller laboratoriebruk.

Ribosomalt protein sammenstillingen ikke fullfører proteinekspresjon prosessen fordi under høsting av bakterie- eller gjærcelleinnholdet blir blandet med sluttproduktet. Uttrykte, rekombinante proteiner må renses ved separering fra de deler av ødelagte celledeler. Noen ganger kan en molekylær tag etiketter proteinet slik at det kan binde seg til en metallisk eller annen substans og isoleres fra avfallet. Forskjellige teknikker eksisterer, avhengig av faktorer som protein størrelse og kompleksiteten av vertscellen.

Humant rekombinant protein uttrykk har omfattende kommersielle og medisinsk bruk. Mange hormoner, antistoffer og enzymer er tidligere ekstrahert fra animalsk eller kadaver vevet, men nå fremstilles syntetisk ved hjelp av rekombinant DNA-teknologi. To spesielt viktige eksempler er menneskelig veksthormon og insulin. Mange hormon erstatning terapi stole på syntetiske proteiner, som gjøre ulike analyser som brukes av molekylære og cellulære biologer i sine laboratorier. I mange tilfeller er bakterier anvendt som vertsceller for enkle produkter, mens mer komplekse rekombinant proteinekspresjon, særlig av gener fra dyr, kan gjøres på sopp og gjær.

  • For å uttrykke rekombinante proteiner, må spesifikke DNA-sekvenser innføres i et vert-genomet.

Hva er mus antistoffer?

February 20 by Eliza

Mus antistoffer, ofte også referert til som monoklonale antistoffer, er immunoglobulinmolekyler som er i stand til å bindes til et spesifikt sete på et antigen, som kan stimulere den naturlige produksjonen av antistoffer i humane immunsystemer. Antistoffer blir brukt av immunsystemet til å gjenkjenne tilstedeværelsen av fremmed materiale, slik som virus og bakterier, og målrette den for ødeleggelse. Produksjon av monoklonale muse-antistoffer først startet i 1975, da forskere Niels K. Jerne, Georges JF Kohler og Cesar Milstein oppdaget en fremgangsmåte for å generere spesifikke antistoffer fra et mus vev kjent som mus verten B-celle. Forskerne var i stand til å produsere cellelinjer fortsatt brukes i dag som en form for terapi for å behandle mange sykdommer, inkludert kreft, og, for dette vant de Nobelprisen i fysiologi eller medisin i 1984. I 1987, hybridomceller, en sammenslåing av en kreftcelle med en normal celle i laboratoriet, ble anvendt for raskt å fremstille muse-antistoffer, kjent som Mabs, for medisinsk diagnostikk.

Antistoffproduksjon ved hjelp av mus antistoffer var et gjennombrudd for medisinsk forskning og behandling av sykdommer. Disse antistoffene har vist seg å være mer rikelig og ensartet enn en persons naturlige antistoffer, og ble derfor sett på som en nyttig måte å øke evnen til immunsystem til å bekjempe sykdom. Forsknings antistoffer produseres nå for en rekke bruksområder, inkludert måling legemiddelnivå i serum, identifisere smittestoffer, skrive blod og vev, for å klassifisere ulike former for leukemi og lymfomer, og mer. Tilpassede antistoffer begynte også å bli produsert i nære slektninger til musene, inkludert hamstere og rotter, så vel som andre arter slik som geiter og sauer.

Som terapeutiske anvendelse av museantistoffer ble utbredt, begynte problemer til overflaten. Innledende behandlinger hos pasienter var godt tolerert, men som etterfølgende behandlinger fortsatte, begynte kroppen å demonstrere en immunrespons på muse proteiner ved å generere humane antistoffer mot dem. Denne reaksjon er kjent som den menneskelige anti-mus antistoffer respons (HAMA), og det kan helt nøytralisere den fordelaktige effekten av behandling med muse-antistoffer, så vel som forårsake allergiske reaksjoner hos noen pasienter. For å minimalisere bivirkninger, ble det rekombinante DNA-fremgangsmåter som brukes til å erstatte opptil 70% av muse-antistoff-protein med en human proteinsekvens. Denne utviklingsprosessen ble ledet av Greg Winter i 1986 ved Cambridge University i Storbritannia, og reduserte den totale mengden originale muse vev i antistoff til 5-10%, noe som gjorde det mye bedre tolerert som en terapi.

Nyere teknologi gjør nå for genteknologi av 100% humane antistoffer for forskning og terapeutiske behandlinger. Så vel, den mest effektive metoden for å generere store mengder mus antistoffer i laboratoriet, den Freund Komplett Adjuvans (FCA) prosess, skapte smertefulle inflammatoriske lesjoner i mus, og ble en oppvarmet mål av protest fra dyreverngrupper som USA baserte amerikanske Anti-viviseksjon Society. Dette senere førte til amerikanske føderale organisasjoner som National Institutes of Health (NIH), og europeiske nasjoner som Sveits og Tyskland krever at in vitro produksjon av mus antistoffer brukes over bruken av voksne lab dyr.

Et rekombinant antigen er et molekyl som består av flere forskjellige typer av proteiner som utløser en immunrespons. Avhengig av typer av proteiner som finnes på innsiden av antigenet, kan et spesielt antigen stimulerer produksjonen av flere typer av antistoffer. Denne mekanismen er ofte anvendt i medisin for å målrettet stimulere menneskekroppen for å produsere antistoffer, så som vaksiner. De antigener i vaksiner fremkalle en immunrespons skreddersys til deres rekombinant struktur.

Riktig immunresponser mot et rekombinant antigen som er viktige når det stimulerende langvarig motstand mot sykdom. Noen antigener stimulere immunsystemet sterkt nok at en eksponering overfører en levetid på beskyttelse mot dem i fremtiden, mens andre produserer en mildere reaksjon som reduserer over tid. Visse vaksiner behøver bare gis en gang, siden et enkelt antigen eksponeringen er tilstrekkelig til å beskytte en person for liv, mens andre må gis periodisk i løpet av et individs liv, så motstanden ikke faller under et kritisk nivå, og la ham eller henne sårbar til sykdom.

En rekombinant antigen ikke alltid kommer fra en ekstern kilde. Menneskekroppen kan produsere sine egne antigener inni cellene, både under normal og unormal funksjon. Cancer tumorceller produserer antigener som stimulerer en rekke reaksjoner i kroppen i tillegg til antistoffproduksjon, inkludert betennelse. Produksjon av antistoffer garanterer ikke at kroppen vil montere et vellykket forsvar mot et antigen, og mens situasjonen kan ikke alltid være så dire som kreft, antibiotika og andre medisiner er noen ganger nødvendig.

En av de mer skammelige kilder til rekombinante antigener i menneskekroppen er resistent bakterie. Disse bakteriene er et betydelig problem, fordi det menneskelige legeme enten ikke kan utvikle egnede antistoffer mot antigenene som de bærer, eller kan ikke generere nok antistoffer. Et rekombinant antigen på en medikamentresistent bakterie skapes når flere proteiner på bakterien overflate bindes sammen på en måte som gjør at visse antibiotika som ikke kan ødelegge bakterien. Denne motstanden tillater organismen å formere seg og spre mer rekombinante antigener rundt sin vert. Ettersom flere rekombinante antigener er gjort, blir muligheten for fremstilling av en resistent stamme av bakterier.

Uten rekombinante antigener, kan effektive medisinske behandlinger være mye vanskeligere å lage. Mangel på rekombinante antigener kan også gjøre kjemper bakterier mye enklere, fordi ingen mikroorganismer noensinne ville bli resistente mot antibiotika. Rekombinante antigener kan fremme både helse og sykdom, avhengig av sammenhengen, og de mange sammenhenger der synes de gjør dem samtidig et verktøy og mål i moderne medisin.

Rekombinant interleukin er et protein dyrket fra mennesker, bestående av sakkarider, nukleotider og aminosyrer. Det er som regel selges i en dehydrert tilstand som skal rekonstitueres med vann, kan være fortynnet med buffere, og i dette tørr tilstand, er vanligvis stabile i to år når de lagres riktig. Rekombinant interleukin-2 (rIL-2) er variasjonen mest hørt om og er produsert av thymus-celler (T-celler) med klynge av differensiering 4 (CD4) og har flere funksjoner for å behandle forskjellige former av inflammasjon. Den brukes først og fremst i å indusere immunresponser og avsluttes for inflammasjon og er foreskrevet i en lang rekke terapeutiske behandlinger.

I medisinske studier, har rIL-2 blitt brukt til å behandle pasienter med kronisk hepatitt B (HB), og resultatene har vært oppmuntrende. Av 11 pasienter som for syv til 28 dager ble gitt daglig intravenøs dosering, mistet en HB "s" antigener og "e" antigener som hepatitt pasienter vanligvis bærer i sitt blod resten av sitt liv, og faktisk fått noen anti-HB-antistoffer. Noen mistet HB "s" antigen og andre mistet "e" antigen og bare én pasient viste ingen endring. Antallet positive CD4-celler ble øket, så vel som naturlige killer T-celler. Fra disse første resultatene har forskere antatt at rIL-2 fungerer som en immunmodulerende middel mot kronisk HB.

For åtte år, med start i 1989, den Cytokine Working Group ved Albert Einstein Cancer Center ved Montefiore Medical Center i Bronx, New York gjennomført på tre fase II-studier. De forsøkte å finne ut om bruk rekombinant interleukin 2 terapeutiske agenter på kreftpasienter med nedsatt metastaser ville føre sine kreft å svare, hvis de kunne ha langsiktig respons, og for å sammenligne toksisitet problemer som kan oppstå. Ved hjelp av både rIL-2 alene og rIL-2 kombinert med ulike doser av rIL-2 med rekombinant interferon-alfa (rIFN-alfa) og andre agenter i kombinasjon og administrert både intravenøst ​​og ved subkutane skudd. De totale responsrate var lik enten for kombinasjoner eller rIL-2 alene; imidlertid rIL-2, gitt alene og i høye doser ga den lengste varighet av responsen.

Rekombinant humant interleukin 2 har også blitt brukt til å behandle for kolorektal kreft for å produsere histaminresponser som tillater kjemoterapier gitte å oppvise forbedrede responser og gjøre dem mer potent mot sarkomer. Med disse suksessene, har leger og forskere brukt disse interleukiner å behandle andre kreftformer og immunsystemsykdommer. Ved hjelp av rekombinant interleukin 2 med HIV-pasienter som har sett litt lettelse fra andre antiretroviral terapi har produsert økninger i både CD4 T-celler og cytokin produksjon, som økte klynge av differensiering 8 (CD8) T-lymfocytter. Langsiktige lettelse utfall ble realisert og de positive endringer i homeostase har tillatt disse pasientene til å lede flere symptomfrie liv.

  • Forskning viser behandlingen av kronisk hepatitt B pasienter med rekombinant interleukin-2 kan være fordelaktig.

Rekombinant deoksyribonukleinsyre (DNA) er et segment av DNA som er kunstig innført i den native DNA i en organisme. Det finnes en rekke bruksområder for rekombinant DNA i de biologiske vitenskaper. I handler, er gener fra andre planter og dyr ofte innsatt i DNA av eksisterende avlinger for å gjøre hardføre planter. I medisin, noen vaksiner bruke rekombinant DNA sammen med viral administrasjon. Det er også mulig å bruke denne teknologien til å erstatte defekte gener med sunn seg.

En av de første bruksområdene for rekombinant DNA var i botanikk. Mange planter har ganske fleksible genom, noe som gjør det mulig for dem å lett innarbeide DNA av fjernere beslektede arter. Ved skjøting i nye gener, har forskere klart å utvikle planter som er motstandsdyktig mot ekstreme forhold, blant annet tørke og varme. Det er også mulig, ved hjelp av rekombinant DNA, for å ta de gener fra visse dyr og skjøte dem i genomene av noen planter for å skape planter som inneholder kjemikalier som gjør dem uappetittlig til forskjellige skadedyr og parasitter.

Administrering av vaksiner gjennom rekombinant DNA er også mulig. For å skape slike vaksiner, en rekke virus, slik som herpes virus, har sitt DNA fjernet og er fylt med rekombinant DNA som inneholder den kodende for å lage antistoffer mot visse sykdommer. Selv om denne teknologien er relativt ny, har det vist seg ganske vellykket, og forskerne håper at det kan utvikles videre for å skape vaksiner for en rekke sykdommer som ikke allerede har dem.

Det er også mulig å bruke rekombinant DNA-teknologi for å helbrede pasienter av enkelte sykdommer. Det er mange tilstander forårsaket av defekt DNA-sekvenser som kan erstattes med friske seksjoner av DNA som blir administrert til pasienten, vanligvis gjennom en viral levering. Forskning tyder på at sykdommer som cystisk fibrose og sigdcelleanemi kan både én dag behandles og forebygges gjennom strukturelle endringer i en persons DNA. Teknologien for å kurere disse sykdommene er fortsatt i utvikling, men de første resultatene er ganske lovende.

Pasienter som mangler DNA-sekvenser som skaper eller anerkjenner behovet for visse enzymer kan også dra nytte av rekombinant DNA-behandling. I dette tilfellet, kan en DNA-tråd som skaper spesifikke proteiner som trengs for å utføre visse oppgaver settes inn i en persons DNA. For mange av disse typer forhold, blir den defekte delen av DNA som ikke trenger å bli erstattet med det rekombinante DNA, som den nye DNA kan ganske enkelt være heftet på normal tråd. Diabetikere som tar insulin gjør bruk av rekombinant DNA-teknologi slik som dette fordi insulinet er fremstilt ved hjelp av denne type teknologi.

  • Når rekombinante DNA-er satt inn i en organisme, tar den organismen på nye egenskaper, slik som gløder i mørket.
  • I noen tilfeller er det mulig å utnytte rekombinant DNA for å behandle og kurere pasientens sykdom.

Hepatitt antistoffer er celler produseres av kroppen for å bidra til å bekjempe de ulike typer hepatitt. Disse antistoffene er av avgjørende betydning ikke bare fordi de hjelper kroppen kontroll invaderende sykdom, men de kan også tjene som markører som kan hjelpe diagnostisere tilstedeværelsen av sykdommen. Antistoffene som er forskjellig for hver type hepatitt.

De mest vanlige typer hepatitt er A, B og C. Det er hepatitt D, men det er bare funnet sammen B. I hvert tilfelle testene for disse sykdommene krever uttak av blod og testing for hepatitt antistoffer som kroppen har produsert for å bekjempe dem. Tilstedeværelsen av disse antistoffer indikerer tilstedeværelse av viruset.

De første hepatitt antistoffer produsert i form av forskjellige typer av immunoglobulin M (IgM). Disse molekylene blir produsert av immunsystemet til å bekjempe virus som finnes i blodet. Tilstedeværelsen av IgM anti-hepatitt A-virusantistoffer betyr et tilfelle av hepatitt A, karakterisert ved at individet ikke har blitt infisert for lenge. Etter en viss tid, kroppen produserer både IgM og immunoglobin G (IgG), der sistnevnte forblir i kroppen, selv etter at infeksjonen har gått. Dette er også antistoffet som vanligvis er gitt i vaksiner mot sykdommen.

Tester for hepatitt B titt for flere antistoffer. Den hepatitt-B-overflateantigen (HBsAg) er produsert av kroppen like etter den trekker seg sammen infeksjonen og indikerer at det er en relativt ny forekomst. Hepatitt B overflate antistoff (HBsAb) blir produsert av kroppen etter at infeksjonen har gått sin gang, og indikerer en infeksjon som har vært aktiv i noen tid, eller en som er allerede borte. Disse hepatitt antistoffer også tjene som en naturlig vaksinering for å holde kroppen fra å pådra seg sykdommen igjen.

Antistoffer for hepatitt C handling og detekteres på en lignende måte. Tilstedeværelse av hepatitt C virus antistoff (HCV Ab) indikerer at kroppen har en gang vært utsatt for infeksjon eller er i ferd med å kjempe en. Hvis denne testen kommer tilbake positiv, kan medisinske fagfolk bestille flere tester for å bestemme kroppens nåværende status.

Hepatitt A er den minst alvorlige av de typer, og disse hepatitt-antistoffer er i stand til å fjerne infeksjonen fra blodstrømmen fullstendig. Med denne fullstendig fjerning, blir tilstanden ikke tilbakefall eller blir kronisk, og tilstedeværelsen av IgG bidrar til å beskytte mot infeksjoner i fremtiden. De andre typer av hepatitt kan bli kronisk, og selv med viruset og antistoffer fortsatt i systemet, kan infeksjonen kan overføres fra en person til en annen.

  • Når hepatitt B-viruset replikerer inne i kroppen, frigjør det hepatitt B-antigener.
  • Testingen for hepatitt omfatter oppsuging av blod og testing for hepatitt-antistoffer i blodet.
  • Begrepet "hepatitt" refererer til betennelse og hevelse i leveren.
  • Symptomer på hepatitt B inkluderer magesmerter, gulfarging hud og mørk urin.

En nøytraliserende antistoff (NAB) er en type antistoff som produseres naturlig som en del av immunsystemresponser. Disse antistoffene hemmer virkningene av eller ødelegge utenlandske agenter som invaderer kroppen. Nøytraliserende antistoffer kan utløses av infeksjon eller vaksinasjon.

Et antistoff er et protein som finnes i blodet eller lymfeknutene. Fremmede stoffer kommer inn i kroppen, og overtar celler til å replikere. Immunsystemet er utløst, og en nøytraliserende antistoff er aktivert. Nøytraliserende antistoffer og deretter blokkere midler, enten ved å ødelegge dem før de invadere cellene eller ved å blokkere reseptorer av viruset.

En bindende antistoff, og en nøytraliserende antistoff bør ikke forveksles med hverandre. Bindende antistoffer binde seg til en utenlandsk agent, flagging det. Hvite blodlegemer er signalisert å ødelegge flagget antigen. Nøytraliserende antistoffer, på den annen side, stoppe funksjonen av agentene.

Medisinsk forskning har vist at en nøytraliserende antistoff har potensial i retrovirusinfeksjoner og spesifikke forhold som ikke har vaksinasjoner for beskyttelse. Som koder for gener for å produsere antistoffer som nøytraliserer spesifikke midler som angriper immunsystemet kan eventuelt behandle infeksjoner som de forårsaker. Denne forskning kan være fordelaktig for behandling av slike tilstander som humant immunsviktvirus (HIV) og multippel sklerose (MS). Begge disse forholdene har vist at de potensielt kan modifiseres for å påvirke effekten at virusene har på kroppen.

Vaksinasjoner mot virus slik som influensa og difteri trene kroppen til automatisk å produsere et nøytraliserende antistoff klynge ved eksponering. Denne automatiske reaksjon har et bestemt formål. Den invaderende virus er nøytralisert før den har en sjanse til å forårsake infeksjon, som er hvordan kroppen utvikler immunitet mot visse virus etter å ha blitt behandlet med vaksinasjoner eller etter eksponering for viruset.

Selv om en nøytraliserende antistoff kan være fordelaktig, besitter det også evnen til å være skadelig. I noen tilfeller, antistoffer angrep medisiner. Antistoffene kan se visse legemidler som utenlandske agenter. Ligner på hvordan nøytraliserende antistoffer kan nøytralisere dårlige agenter, kan de negere effekten at medisinene er laget for å ha på kroppen. Mange protein-baserte legemidler som brukes i immunterapi, som interferon, er målrettet av nøytraliserende antistoffer.

Immunsystemet er komplisert. Kropp og celle forsvar gjennom denne naturlige prosessen er viktig, men det er mye som legene fortsatt ikke vet. Forskning hjelper det medisinske fellesskapet lære mer om rollen som nøytraliserende antistoffer spille i den totale funksjon av immunsystemet.

  • Medisinsk forskning som involverer nøytraliserende antistoffer har vist noe håp for behandling av HIV og andre virus i menneskekroppen.

Antithyroid antistoffer er en type antistoff produsert av immunsystemet hos mennesker med en bestemt form for autoimmun sykdom. Som et resultat av fremstilling av antistoffer antithyroid, angriper immunsystem-celler av skjoldbruskkjertelen, som fører til nedsatt thyroideafunksjonen, hypotyroidisme. Visse autoimmune sykdommer kan føre til utvikling av slike antistoffer.

Bursa-avhengige lymfocytter, ofte kalt B-lymfocytter, er celler av immunsystem som genererer proteinmolekyler som kalles antistoffer. Disse proteinene er spesielt rettet mot å feste til fremmede proteiner slik som de fra bakterier og virus. Festingen av antistoffer mot proteiner på bakterier eller virus gjør patogener utsatt for ødeleggelse av andre celler i immunsystemet.

I et sunt immunsystem, B-lymfocytter danne antistoffer som er spesifikke bare for fremmede celler. Noen ganger kan imidlertid Immunsystemet blir dysfunksjonelle på en måte som fører til at B-lymfocytter til å produsere antistoffer mot proteiner i kroppen. Disse antistoffene kalles autoantistoffer. I teorien kan nesten en hvilken som helst protein i kroppen bli målrettet av autoantistoffer. I praksis noen proteiner har en tendens til å bli mål oftere enn andre.

Årsakene til at immunsystemet blir dysfunksjonelle på denne måten er ikke godt forstått. En mulighet er at det forekommer som et resultat av en immunrespons mot et patogen. Denne teori antyder at noen av proteinene fra patogenet ligne visse kroppsproteiner tett nok til at antistoffer dannet mot patogenet også reagere mot kroppen proteiner. Etter at infeksjonen er over, kan immunsystemet kan trigges til å angripe de kroppsproteiner.

Visse proteiner i skjoldbruskkjertelen er inkludert i denne kategorien. Den skjoldbrusk er en liten kjertel som ligger foran luftrøret, som produserer hormoner som regulerer stoffskiftet. Antithyroid antistoffer tendens til å blande seg tungt i skjoldbruskkjertelen funksjon, noen ganger forårsaker tilstander som kalles hypertyreose og hypotyreose. I hypertyreose, blir skjoldbruskkjertelen aktiv, noe som fører til symptomer som utilsiktet vekttap, rask puls, skjelving, angst, søvnløshet og tretthet. Hypotyreose reduserer skjoldbrusk aktivitet, forårsaker vektøkning, tretthet, kulde intoleranse, hårtap, tørr hud og forstoppelse.

Det er noen spesifikke autoimmune lidelser forårsaket av antithyroid antistoffer. Disse er Hashimotoâ € ™ s thyroiditt og Gravesâ € ™ sykdom. Hashimotoâ € ™ s thyroiditis, en type kronisk skjoldbruskkjertelbetennelse, er en vanlig årsak til hypotyreose. Gravesâ € ™ sykdommen fører til hypertyreose og er den vanligste årsaken til en overaktiv skjoldbruskkjertel. Disse skjoldbrusk autoimmune lidelser er diagnostisert ved hjelp av tester laget for å påvise nivåer av antithyroid antistoffer i blodet.

  • Skjoldbruskkjertelen er en liten kjertel som ligger foran luftrøret.
  • Antithyroid antistoffer angripe celler i skjoldbruskkjertelen, som fører til nedsatt funksjon og hypotyreose.
  • Utilsiktet vekttap er et symptom på hypertyreose.
  • Problemer med skjoldbruskkjertelen kan føre til høyt blodtrykk.

Antimitochondrial antistoffer (AMA) er autoantistoffer, eller antistoffer mot selv, som er rettet mot mitokondrier. En mitokondrie er en organelle, eller en struktur i en celle, som bidrar til å produsere energi i cellene, kontrollere cellevekst og forårsaker celledød, blant andre funksjoner. Et antistoff er et protein som kalles et immunoglobulin som fungerer med immunsystemet til å finne og avvæpne skadede celler og fremmede objekter, for eksempel virus eller skadelige bakterier. I en frisk pasient, gir immunsystemet flere avgjørende forsvarsmekanismer for kroppen, men når immunsystemet feilaktig slår mot friskt vev i kroppen, kan det føre til alvorlige sykdommer som kalles autoimmune lidelser. Tilstedeværelsen av antimitochondrial antistoffer i blodet indikerer en autoimmun sykdom, slik som primær biliær cirrhose (PBC), reumatoid artritt, autoimmun hepatitt, systemisk lupus erythematosus, eller thyroiditis.

Et antistoff er et protein som består av to tunge polypeptidkjeder og to lette polypeptidkjeder som danner en "Y" -form. Stammen av "Y" er den konstante region, av hvilke det finnes fem klasser, eller isotyper, som styrer hvor antigenet er ødelagt og hvordan immunsystemet skal reagere. Et antigen er målet for antistoffet, eller mitokondrier i tilfelle av antimitochondrial antistoffer. De to armene av "Y" dannes de variable regioner av antistoff, som omfatter de hypervariable regioner og antigen-bindingsseter. De antigen-bindingsseter er spesielt utformet, enten ved tilfeldig sammensetning eller i respons til en immunreaksjon, for å gjenkjenne et meget spesifikt antigen, og deretter bindes til det og ødelegge det.

I en sunn kropp, en mekanisme som kalles immuntoleranse hindrer kroppen fra å angripe visse antigener, slik som kroppens friske vevet. Antistoffer som ikke gjenkjenner selv og prøve å angripe friskt vev blir fjernet fra systemet. Noen eksterne antigener, eller ikke-selvantigener, for eksempel en organtransplantasjon eller et foster i en gravid kvinne, krever et immunsystem mekanisme som kalles ervervet toleranse.

Tilstedeværelsen av antimitochondrial antistoffer i kroppens væsker innebærer at immunsystemet har mistet sin toleranse på mitokondrier, eller mistet sin evne til å gjenkjenne mitokondrier som en del av seg selv. Disse antistoffene deretter målrette et protein som finnes på et enzym kompleks, kalt pyruvatdehydrogenase komplekse-enzymet 2 (PDC-E2), i den indre foring av mitokondrier. Ofte er mitokondriene i leveren mest berørt.

Autoimmun hepatitt oppstår når immunsystemet angriper leveren, forårsaker betennelse, eller hevelse, og skrumplever på sene stadier. Cirrhose refererer til arrdannelse i levervevet, noe som kan føre til svekket leverfunksjon. Autoimmun hepatitt presenterer symptomer på mørk urin, blek avføring, tretthet, tap av matlyst, generell kløe, kvalme og mage hevelse og vanligvis oppstår hos unge kvinner med familie historie av sykdommen. En positiv blodprøve for antimitochondrial antistoffer, blant andre tegn, blir ofte brukt for å diagnostisere sykdommen.

AMA blodprøve kan også bli brukt til å diagnostisere primær biliær cirrhose (PBC). Av ukjente årsaker, irriterer PBC gallegangene i leveren, forårsaker betennelse, og deretter blokkerer av gallegangene. Denne hindring deretter forårsaker celleskade i leveren, og til slutt cirrhose. Denne sykdommen først og fremst oppstår hos middelaldrende kvinner og presenterer symptomer på gulsott, magesmerter, kløe, abdominal hevelse, fet avføring, og samling av fett under huden.

  • Mitchondria gi energi til dyreceller.
  • Antimotochondrial antistoffer angripe mitokondriene, små organeller som overvåker cellevekst.

En bindende antistoff er et proteinmolekyl produseres av kroppen som en immunrespons. Antistoffer, også kjent som immunglobuliner, er generert av immunsystemet til å finne og angripe fremmede organismer i kroppen. Disse organismene - eller deler av dem - kalles antigener. En bindende antistoff er et antistoff som har en reaksjon når den kombineres med et antigen, låsing av antigen til den før arbeidet med å fjerne eller nøytralisere den.

Antistoffer er i stand til å oppdage og reagere på de invaderende mikroorganismer som kalles antigener; imidlertid, kan B-celle-reseptoren (BCR) antistoffer krever hjelp fra andre celler for full aktivering. Antigener er makromolekyler med minst en antigen determinant, eller en del av antigenet som immunsystemet gjenkjenner. De er også kalt immunogener fordi de forårsaker en immunrespons. Disse inntrengerne kan være alt fra en bakterie eller et virus til pollen.

Den bindende antistoff reagerer med fremmede organismer i løpet av en humoral immunrespons. En humoral immunrespons oppstår når antistoffene utskilles fra i kroppsvæskene. Dette skiller seg fra cellulær immunitet, som er avhengig av spesielle typer hvite blodceller til å angripe fremmede organismer.

Antistoffer er bygget opp av fire polypeptider. To tunge kjeder og to lette kjeder gå sammen for å danne en Y-formet molekyl. En aminosyresekvens som er på spissen av hver Y gren, og er kjent som en paratop. I likhet med en lås, er en paratop utformet for å passe til en bestemt epitop.

Overflaten av hvert antigen inneholder en epitop. En epitop tilsvarer omtrent en nøkkel, er spesifikke for hvert antigen, og er anerkjent av den tilsvarende paratop av antistoffet. Når paratopen og epitopen passer sammen, festes den bindende antistoff til antigenet. Denne interaksjonen er referert til som antistoffbinding.

Når det er bundet, er det to måter en bindende antistoff kan fjerne mikroben. Antistoffet kan markere den infiserte celle for angrep av andre komponenter i immunsystemet. Når dette skjer, andre celler slik som T-hjelperceller, blir aktivert for å ødelegge invaderende organismer. Alternativt kan den bindende antistoff nøytraliserer antigenet direkte. Organismen kan elimineres ved å blokkere det området som er avgjørende for dens evne til å invadere og overleve.

Antifosfolipid antistoff syndrom er en klumpingslidelse hvor en pasients blod begynner å koagulere unormalt som et resultat av en rekke autoimmune reaksjoner. I primær tilfeller av sykdommen, pasienter utvikler tilstanden uten forhåndsdefinert og potensielt koblet årsaker, mens sekundærtilfeller oppstår når pasienter har en eksisterende autoimmun lidelse og antifosfolipid antistoff syndrom vises som en komplikasjon. Forvaltning av denne tilstanden vanligvis innebærer å behandle pasienten med antikoagulerende medisiner for å bryte opp klumper og forhindre potensielt fatale konsekvenser av blodpropp, som hjerneslag.

I en pasient med antifosfolipid antistoff syndrom, utvikler immunsystemet antistoffer mot forbindelser som finnes i blodet og begynner å angripe dem. Dette fører til tung levrer seg. Pasienten er i risiko for dyp venetrombose, hvor en blodpropp former i beinet, sammen med blodpropp andre steder i kroppen, som lungene. I tillegg kan denne tilstanden forårsake et slag hvis en blodpropp former i hjernen eller til hjernen.

Hos gravide kvinner, kan antiphospholipid antistoff syndrom føre til alvorlige komplikasjoner, inkludert graviditet tap. Gravide kvinner har en tendens til å være i fare for clotting problemer i normale forhold, og fremveksten av et problem med blod koagulasjon i svangerskapet er en grunn til bekymring. En fødselslege kan vurdere en pasient med en klumpingslidelse å fastslå graden av risiko og utvikle en hensiktsmessig plan for forvaltning av svangerskapet.

Symptomer på antifosfolipid antistoff syndrom kan omfatte smerter i ett av ekstremiteter og utslett. Pasientens blod kan trekkes for å lete etter antifosfolipid antistoffer, selv om det er viktig å være klar over at nærværet av disse antistoffer ikke nødvendigvis betyr at pasienten har sykdommen. Rundt to prosent av befolkningen synes å naturlig utvikle antifosfolipid antistoffer uten noen syke effekter. For en fast diagnose, vil en lege må bekrefte tilstedeværelsen av problemer med blodkoagulasjon og utelukke alle andre mulige årsaker til pasientens klumpingslidelse.

Behandling av denne tilstanden begynner med bruk av antikoagulanter til å bryte opp klumper og redusere risikoen for komplikasjoner. Hvis en blodpropp har dannet og kan ikke brytes fra hverandre med narkotika, til kirurgi fjerne det kan være nødvendig. I tilfellet av pasienter som har utviklet komplikasjoner som slag, kan ytterligere medisinske tiltak være nødvendig. For gravide kvinner som ikke opplever graviditet tap, vil svangerskapet bli klassifisert som høy risiko, og pasienten må overvåkes nøye gjennom hele svangerskapet. Kvinner som har antifosfolipid antistoff syndrom kan være lurt å vurdere å unngå graviditet på grunn av den økte risikoen.

  • Unormal blodpropp er en alvorlig symptom på antifosfolipid antistoff syndrom.
  • En gravid kvinne som har antifosfolipid antistoff syndrom kunne lide alvorlige komplikasjoner.
  • En fødselslege kan bestille tester for å vurdere om hennes pasient har antifosfolipid antistoffer.
  • En pasients blod kan trekkes slik at for å lete etter antifosfolipid antistoffer.

Hepatitt C-antistoffer er et protein-basert stoff som immunsystemet frembringer som reaksjon på en infeksjon med hepatitt C virus (HCV). Antistoffene gjenkjenne viruset i kroppen og prøver å ødelegge den. Hepatitt C-antistoffer kan ta noen uker til noen måneder kan påvises gjennom blodprøver. Testet positivt for antistoffer betyr ikke at det er en aktiv HCV infeksjon. Ytterligere blodprøver må bli utført for å bekrefte tilstedeværelse av levende hepatitt C-virus.

Antistoffer er immunglobuliner, som er proteiner som er utviklet av immunsystemet som respons på et spesifikt antigen. Bakterier og virus er klassifisert som antigener. Antistoffet som dannes har et reseptorsete på tuppen av proteinet som bare binder seg med den nøyaktige antigen som den ble utviklet. Hepatitt C-antistoffer produseres av plasmaceller i det humorale immunsystemet, og blir deretter utskilt i blodet.

Testen for hepatitt C-antistoffer kan ikke være et nyttig diagnostisk verktøy for folk som har redusert immunforsvar, som de ikke utvikler antistoffer fordi deres immunsystem er ikke funksjonell. Hvis en person har et positivt testresultat som viser hepatitt C-antistoffer, vil legen bestille en annen blodprøve kalt HCV ribonukleinsyre (RNA) test for å avgjøre om en kronisk HCV infeksjon eksisterer. De fleste mennesker ikke har noen symptomer i akuttfasen av sykdommen. Hvis viruset fremdeles er til stede i kroppen etter seks måneder, blir infeksjonen klassifisert som kronisk hepatitt C.

Kronisk hepatitt C-virus forårsaker betennelse i leveren, noe som kan forårsake skade på leveren. Arrdannelse, eller skrumplever, lever hindrer normal funksjon av orgelet. Forhøyede nivåer av leverenzymer er vanlig hvis en pasient har hepatitt C. De fleste mennesker med hepatitt C vil bare utvikle en mild form for infeksjon som fører til mindre skader på leveren. Total leversvikt er mindre vanlig med HCV enn med de andre former for hepatitt.

Eksponering til HCV-virus vil føre til hepatitt C-antistoffer til å danne, selv om det ikke er en aktiv infeksjon. De mest utsatte for å utvikle HCV er helsepersonell og folk som bruker injiserbare legemidler og dele forurensede sprøyter. En annen kategori høy risiko er mennesker som trenger periodiske blodoverføringer, for eksempel blødere og folk med nyresykdom.

Tilstedeværelsen av hepatitt C-antistoffer innebærer ikke hepatitt C immunitet. Hepatitt C-virusstammer kan bli reaktivert selv etter behandling ødelegger alle aktive virus påvist i blodet. Hepatitt C-antistoffer vil forbli påviselig for resten av personligheten € ™ s levetid.

  • Personer som er smittet med hepatitt er ikke kvalifisert til å donere blod.
  • Hepatitt C-antistoffer kan ta noen uker til noen måneder kan påvises gjennom blodprøver.
  • Begrepet "hepatitt" refererer til betennelse og hevelse i leveren.

Når kroppen angriper visse deler av sin egen skjoldbruskkjertelen, kan bevis på dette finnes i nærvær av unormale molekyler som kalles thyroid peroxidase (TPO) antistoffer. Andre vilkår for disse stoffene er antithyroid mikrosomale antistoffer eller antiperoxidase antistoffer. Forhøyede nivåer er tettest forbundet med Hashimotos tyreoiditt, men kan også sees med Graves 'sykdom. En viss andel av asymptomatiske folk uten skjoldbrusk problemer teste positivt for dette antistoffet, og disse menneskene har økt risiko for å utvikle skjoldbrusk abnormiteter i fremtiden.

Generelt, er tilstedeværelsen av thyroid peroxidase-antistoffer i blodet en unormal funn. Antistoffer er proteiner laget av immunsystemet som hjelper bekjempe bakterier eller andre trusler for kroppens helse. Selv om kroppen normalt bare gjør antistoffer mot fremmede stoffer, i en viss klasse av sykdommer som kalles autoimmune lidelser kroppen gjør antistoffer mot elementene i seg selv. Med produksjonen av TPO-antistoffer, er kroppen lage et protein som angriper et molekyl viktig for funksjonen av skjoldbruskkjertelen, skjoldbruskkjertelen peroksydaseenzym. Dette stoffet er vesentlig for å skape thyroglobulin, som er et protein som bærer thyroid hormon gjennom blod å fjerne deler av kroppen.

Et positivt resultat for tilstedeværelsen av thyroid peroxidase antistoffer er oftest funnet i autoimmun tyreoiditt, en tilstand som også er kjent som Hashimotos thyroiditis. Pasienter med denne sykdommen lage antistoffer som angriper skjoldbruskkjertelen. De til slutt oppleve en reduksjon i produksjonen av skjoldbrusk hormon, en tilstand som kalles hypotyreose. Mange leger mener at å finne positive TPO antistoffer hos en pasient som har hypotyreoidisme å være diagnostisk for Hashimotos thyroiditis. Bærebjelke i behandling for denne tilstanden er å gi pasienten med supplerende hormonet tyroksin i tablettform.

Ha thyroid peroxidase-antistoffer er også forbundet med en rekke andre forhold. Pasienter med Graves 'sykdom, en autoimmun thyroid lidelse som fører til skjoldbrusk til å overprodusere thyroid hormon, kan ha thyroid peroxidase antistoff som er tilstede i blodet. Noen studier har antydet at kvinner som produserer dette antistoffet har økt risiko for å utvikle reproduktive problemer så tidlig levering i svangerskapet, spontanaborter, og infertilitet.

Noen normale, asymptomatiske folk kan ha påvisbare nivåer av skjoldbrusk peroxidase antistoffer. Så mye som 5 til 10 prosent av befolkningen vil ha positive resultater på dette laboratorietest, hvis sjekket. Selv om mange ganger disse menneskene ikke har noen symptomer, kan de være i fare for å ha problemer med deres thyroid funksjon i fremtiden. Noen leger sjekke dette antistoffnivået før du starter visse medisiner som kan føre til hypotyreose, inkludert amiodaron og litium, fordi de kan velge å ikke bruke disse stoffene hos pasienter som allerede i faresonen for å utvikle problemer med skjoldbrusk hormon produksjon.

  • Laboratorietester kan være nødvendig for å identifisere thyroid peroxidase antistoffer hos asymptomatiske pasienter.
  • Tilstedeværelsen av thyroid peroxidase-antistoffer i blodet er en unormal funn.

Antikardiolipin antistoffer er antistoffer som kroppen skaper å målrette kardiolipin og fosfolipid. Kardiolipin er en del av den indre delen av mitokondriemembranen i celler. Fosfolipidet er en stor del av celleveggen. Antistoffene direkte angripe kardiolipin og fosfolipid av celleveggene.

Også kalt antifosfolipid syndrom, de anticardolipin antistoffer oppstå som et resultat av spesifikke problemer, såsom liveoid vaskulitt, lupus, og syfilis. Selv om mange mennesker opplever symptomer fordi det er en tilstand til stede, kan noen mennesker ikke har symptomer i det hele tatt. Det er ofte diagnostisert når symptomene oppstår og bli spesielt belastende for den lidende.

Når antikardiolipin antistoffer er til stede, kan pasienten oppleve hyppige blodpropper. Disse blodpropper kan bli funnet i bena, vitale organer og hjerne. Blodpropp i bena er kjent som dyp venetrombose. Vitale organer som lunger, nyrer eller hjerte, kan lide skade og føre til organsvikt. Når klumper oppstår i hjernen, nevrologiske symptomer eller slag er sannsynlig.

Bare testing kan bekrefte tilstedeværelse av antikardiolipin antistoffer. Blodprøver kan hjelpe enkelt ut antistoffer. Det er sannsynlig at en spesialist vil bestille testing som et diagnostisk tiltak når du prøver å finne den eksakte årsaken til en blodpropp. For eksempel vil en gynekolog eller fødselslege bestille testen hvis en spontanabort eller graviditet komplikasjoner oppstår, og en hematologist vil være på jakt etter årsaken til beinet propper.

Blodprøve for antikardiolipin antistoffer utføres mer enn én gang. Når flere klumper eller problemer med graviditet oppstår, vil en lege bestille testing. To testene er i utgangspunktet gjennomført og er plassert 12 uker fra hverandre, og de antistoffer må være til stede begge ganger for å bekrefte diagnosen. I noen tilfeller er det nødvendig å utføre mer enn to tester, som også vil bli adskilt 12 uker fra hverandre.

Hvis blodpropper oppstå som et resultat av en underliggende tilstand, må behandling for denne tilstand begynner. Behandling for tilbakevendende blodpropp er også anbefalt. I mange tilfeller vil leger fore blodfortynnende for å bidra til å forhindre blodpropp. Low-dose aspirin terapi kan også være nyttig.

Tett oppfølging er avgjørende. Pasienter på medisiner må passes for blødning fordi blodfortynnende hindre blodet fra clotting. En liten skade kan være farlig. Pasientene må også bli sett for nye klumper eller alvorlig skade fra eksisterende blodpropp. Kvinner som er gravide og tar medisiner får regelmessig overvåking og sjekk-ups for å overvåke helsen til det ufødte barnet.

  • Blodprøver kan hjelpe enkelt ut antikardiolipin antistoffer.
  • En gynekolog kan bestille en test for å se etter anticardioplin antistoffer i hennes pasient.

Monoklonale antistoffer er antistoffer som er identiske fordi de er produsert av spesialiserte celler som er blitt klonet. Det finnes en rekke anvendelser for monoklonale antistoffer, som strekker seg fra medikamenttesting til behandling av kreft, og de er produsert i laboratorier over hele verden. Som mange medisinske oppdagelser, er monoklonale antistoffer som også sammen med en viss kontrovers, fordi de er fremstilt i mus, og det er ingen logistisk måte for å gjøre dem fra humane celler.

Antistoffer er utviklet av kroppen når den utsettes for fremmede stoffer. De somle i kroppen, overdragelse immunforsvar lenge etter at eksponeringen er over, og de er også svært raffinert, designet for å skille mellom svært like fremmede stoffer. Den nøyaktige målretting av antistoffer ble et tema av interesse i det 20. århundre, og i 1970 ble de første monoklonale antistoffer utviklet, slik at forskere å produsere et stort antall rene antistoffer i et laboratorium setting.

For å gjøre disse antistoffene er en mus eksponert for et antigen, og cellene ble oppsamlet fra milten. Disse celler dyrkes med celler fra en myelom, en kreft i plasmaceller, for å skape et hybridom som vil formere seg i det uendelige. De gjennomkjøringer kan bli testet for å finne de cellene som produserer det ønskede antistoff eller antistoffer, og disse cellene kan bli klonet og brukt til å utvikle et stort lager av monoklonale antistoffer. De resulterende antistoffer er rene, uten andre stoffer, noe som gjør dem overlegne i forhold til antiserum, og de vil fortsette å reprodusere på ubestemt tid, takket være den udødelige natur av tumorcellene som brukes for å gjøre det hybridom.

Når de er fremstilt, kan monoklonale antistoffer som kan brukes i screening-tester. For eksempel kan en lege testing av medikamenter, eller nærvær av en sykdom eksponere en pasients blodprøve for monoklonale antistoffer som vil reagere med antigenet i spørsmålet om det er tilstede, som varsler legen til tilstedeværelsen av hva han eller hun er testing for . Monoklonale antistoffer kan også modifiseres slik at de kan brukes i rensing, ved å bindes til et bestemt antigen, og tillater alle andre stoffer i en prøve som skal vaskes vekk.

For behandling av kreft, monoklonale antistoffer har store muligheter, fordi de kan være blandet med radioaktive midler eller andre forbindelser og innføres i legemet, rettet mot kreftceller og cancerceller alene. Produkter som brukes i medisinsk behandling har alle navn som ender med -mab, på "monoklonalt antistoff.

Forskere er motvillige til å utvikle disse spesielle antistoffer med menneskeceller, fordi de mener at det ikke er etisk å utsette mennesker for antigener. Noen forskere har foreslått at fremskritt i biovitenskap vil gjøre produksjonen av monoklonale antistoffer in vitro er mulig, for derved å tillate forskere å unngå å bruke levende dyr eller mennesker.

Hva er Rekombinant Cloning?

October 1 by Eliza

Rekombinant klonings refererer vanligvis til rekombinante DNA-teknikker. Dette innebærer å kombinere av DNA-sekvenser som ikke ville naturligvis eksisterer. Disse teknikkene er også noen ganger kalt genteknologi. Spesifikke segmenter av DNA som er isolert og kombinert i en mindre enhet av DNA som vil replikere og forsterke antallet av klonede DNA-molekyler.

Vertsorganismer for rekombinant kloning er ofte bakterier. Kjøretøyet av DNA som brukes for kloning er kjent som en vektor, og er vanligvis et virus eller et plasmid - et sirkulært stykke av bakteriell DNA som er utenfor det bakterielle kromosom. Et plasmid for kloning vil ha et replikasjonsorigo slik at det kan replikere seg selv, et kloningssete, og en slags selekterbar markør, slik som antibiotikaresistens. Dette vil sikre at valget og formering av cellene inneholdende klon.

Den kloningssete har en spesialisert sekvens som vil være klart for en spesiell restriksjonsendonuklease - et enzym som gjenkjenner spesifikke DNA-sekvenser og kutter nukleotider. Plasmidet vil først bli kuttet, slik at den er lineær. Forskere generelt prøver å bruke restriksjonsendonukleaser som forlater "klebrige ender" som overlapper hverandre, og vil glødning i endene av målgenet med kompatible sekvenser i vektoren ved hjelp av ligase, og dermed gjenopprette den til en sirkel. Når genet er blitt klonet i vektoren, blir vektoren innført i dets ekspresjon vert, vanligvis ved en prosess kjent som transformasjon, og vokst opp i store mengder. DNA kan deretter bli isolert og anvendt i eksperimentene.

Rekombinant klonings har muliggjort analyse av store mengder av molekyler som er normalt bare forbigående uttrykt i cellen, slik som mRNA og proteiner. Dette har revolusjonert studiet av biologi. Det er mange praktiske anvendelser av rekombinant kloning.

Proteiner, slik som humant veksthormon kan uttrykkes i store mengder gjennom rekombinant kloning. Transgene planter som blir brukt i landbruket for å hindre angrep av insekter og patogener. Mange matvarer er blitt genetisk modifisert for å forbedre dem, og kyr har blitt behandlet med bovint veksthormon fremstilt ved rekombinant kloning for å øke melkeproduksjonen. Genterapi er blitt brukt i mange terapier, inkludert for å herde en form for blindhet. Dyr blir selv blir klonet, selv om klonene ofte lider helseproblemer.

Noen bruk av rekombinant kloning er svært kontroversielt. Mange mennesker er imot å spise genmodifisert mat eller drikke melk med rekombinant hormon i det. Det er mye bekymring for at avlinger som har blitt genetisk endrede kan spre sine nye gener inn i de lokale flora.

Noen mennesker er filosofisk motsetning til å endre eksisterende livsformer. Det er nesten universell fordømmelse av ideen om menneskelig kloning. Det gjenstår å se om disse nye teknologiene vil nå sitt fulle praktisk potensial, eller om samfunnet vil begrense bruken.

  • For å gjøre genteknologi, må spesifikke segmenter av DNA som skal isoleres.
  • Kiwi, appelsiner og andre frukter er blitt genetisk modifisert til å være motstandsdyktig mot visse sykdommer.

Hva er en FITC antistoff?

November 20 by Eliza

En fluorescein isotiocyanat-konjugert (FITC) antistoff er et fluorescerende molekylær markør meget spesifikt for enten et bestemt protein eller et primært antistoff. De blir brukt til å identifisere proteiner i immunocytokjemi, enzym og protein aktivitetsanalyser, flowcytometri, og Western blotting. De fleste FITC antistoffer kan kjøpes gjennom spesialiserte molekylærbiologi selskaper eller gjort av private forskningslaboratorier.

FITC er et fluorokrom ofte konjugert eller knyttes til et antistoff for å foreta en bestemt, fluoriserende markør. Når de utsettes for elektromagnetisk energi ved en bestemt bølgelengde, fluorokromer er kjemikalier som vil absorbere den energi og avgir et foton med en bestemt bølgelengde. FITC absorberer energi ved 495 nm og avgir et foton på 521 nm. Hver fluorokrom har forskjellig absorpsjon og emisjon område, slik at for systematisk deteksjon av mange fluorchrome bundne antistoffer i ett stykke vev eller prøve. Dette ligner på merking av ulike deler av en celle med forskjellige farger og deretter ved hjelp av spesialiserte briller for å se på bare én farge om gangen.

Antistoffer kan bindes, eller konjugert til FITC-molekylet for å frembringe et FITC-antistoff. Det FITC-antistoff kan brukes til å direkte eller indirekte merke et protein. Når et FITC antistoff etiketter et protein direkte, den fungerer som det primære antistoff, eller et antistoff som er i direkte kontakt med antigenet. Indirekte bruk av et FITC-antistoff skjer når det brukes som et sekundært antistoff, bindes spesifikt til et primært antistoff. Når et FITC-konjugert antistoff blir anvendt direkte, tar merkingsprosedyren kortere tid, men merking er ikke så sterk. Indirekte merking tar et ekstra trinn, men signalet eller etiketten forsterkes fordi flere FITC-merket sekundære antistoffer kan feste til en enkeltstående primære antistoff.

Det er mange bruksområder for FITC antistoff i celle- og molekylærbiologi. Denne typen av antistoff kan anvendes alene eller i kombinasjon med andre monoklonale eller polyklonale antistoffer for å merke spesifikke proteiner i celler i en teknikk kjent som immunocytokjemi. FITC-antistoffer kan også bli anvendt i slike metoder som enzym og protein aktivitetsanalyser, flowcytometri, og Western blotting.

FITC konjugerte primære og sekundære antistoffer er allment tilgjengelig gjennom mange molekylærbiologi selskaper. Det er også mulig for laboratorier å forberede sine egne primære antistoffer og deretter bruke et kit å bøye FITC til dem. Noen selskaper vil ta lab forberedt primære antistoffer og bøye dem til FITC fluorokrom for en lab. FITC-konjugert sekundære antistoffer er ikke vanligvis laget av private forskningslaboratorier, og er vanligvis kjøpt fra selskaper som spesialiserer seg på produksjon av sekundære antistoffer.

Western blot-antistoffer er store Y-formede proteiner, eller immunoglobuliner, produsert til bruk i Western blot immunanalyse, for å detektere et test en assosiert protein i en vevskultur. Mange selskaper har spesialisert seg på å produsere og gi antistoffer til laboratorier som bruker metoden Western blott. Det finnes to typer av Western blot antistoffer som kan produseres i laboratoriet: monoklonale og byclonal. Fremgangsmåten og type antistoff som produseres er avhengig av hvor antistoffet gjengir naturlig i vertskroppen. I Western blot-testing, er en prosess som kalles gel-elektroforese som brukes til å separere proteiner som er native til den vevsprøve fra målrettede Western blot-antistoffer, noe som fører til positiv identifikasjon.

Nesten en hvilken som helst substans kan brukes til å produsere et monoklonalt antistoff som vil binde seg til sitt tilhørende protein i et Western blot-kultur. Polyklonale antistoffer blir produsert i store deler av den samme måten, men prosessen er mer komplisert ved at antistoffene må høstes fra immun B-celle ressurser stedet for å være rett og slett klonet fra en overordnet celle. Den voksende teknologi for å produsere immunoglobulin fra varierte stoffer er ansett som et uvurderlig verktøy i biokjemi, molekylærbiologi, og medisin. Western blot analyse kan påvise proteiner assosiert med HIV, Lyme sykdom, og Creutzfeldt-Jakobs sykdom-Mad Cow sykdom-, noe som fører til legene å kunne foreta en endelig diagnose tidligere i løpet av sykdomsprogresjon. I tillegg til disse programmene, kan rettsmedisin også bruke Western blot antistoff teknologi for å identifisere blod eller annet stoff prøvene på et åsted.

Uavhengig av sitt program, starter prosessen med å identifisere en målrettet protein i en vevsprøve med gjengivelse av et kvantum av antistoffet fra en kjent kilde. Monoklonale antistoffer kan fremstilles av eksisterende kultur, men fremgangsmåten for å produsere polyklonale antistoffer som er betydelig mer tidkrevende. Prosessen innebærer vanligvis injisere et vertsdyr, som en mus eller geit, med enten inaktive eller levende partikler, noe som medførte at dyrets B-lymfocytter produserer immunglobuliner som er spesifikke for antigenet. Deretter blir rensemidler og buffere tilsettes prøven som vil hindre nedbrytning av immunglobuliner ved noen naturlige enzymer, og gelelektroforese blir brukt til å separere proteiner ved molekylvekt eller isoelektrisk ladning. Western blot-antistoffer er nå klar til å gjennomgå "blotting" -prosess, som er overføring av antistoffene til en membran samtidig å notere de spesifikke blot mønstre som produseres under overføringen som er unike for proteinet som blir identifisert.

  • Western blot antistoff teknologi kan brukes til å identifisere kriminalitet sceneprøver.

Studiet av antistoffer kan være et viktig område i biomedisinsk forskning og utvikling. Generelt, er dette på grunn av de verdifulle rolle antistoffer kan spille for å hjelpe immunsystem fungerer ordentlig. Antistoff lagring i laboratorier kan være en betydelig del av forskningen og utviklingsprosessen, som riktig lagringsmetoder kan bidra til at antistoffene forblir uskadet.

Antistoffer er typer av proteiner som vanligvis finnes i blodet. De vanligvis anses å være en viktig del av immunsystemet, som bruker dem til å både identifisere og bekjempe bakterier og virus. Alle antistoffer har normalt den samme grunnleggende struktur, men et område på tuppen av proteinet kan variere innen vide grenser. Forskjellene i antistoffer tillate dem å utføre forskjellige funksjoner for immunsystemet, slik som å assistere i deaktiveringen av en rekke forskjellige typer bakterier og virus.

Det finnes ingen standard metode for å påvise antistoff lagring. Dette er vanligvis på grunn av den store variasjonen av antistoffer som finnes, kombinert med mangel på konsensus i det vitenskapelige miljøet om de beste metodene for lagring. Imidlertid, ettersom antistoffer er proteiner, de fleste metoder for lagring understreke at antistoffer skal holdes kaldt. Dette betyr vanligvis at antistoffer skal kjøles, holdt på is eller frosset.

Mange eksperter anbefaler at antistoffer holdes ved en temperatur på 39 grader Fahrenheit (4 grader Celsius) ved begynnelsen av lagringsprosessen. Tilnærminger kan variere på hvor lenge denne temperaturen bør opprettholdes. Noen forskere tror at denne temperatur bør bare opprettholdes for en maksimalt to uker, hvoretter antistoffet er å være riktig frosset. Etterpå blir en temperatur på -2 grader Fahrenheit (-20 grader Celsius) vanligvis anbefales, selv om enkelte forskere vil lagre antistoffer ved en temperatur så lavt som -112 grader Fahrenheit (-80 grader Celsius).

Plasseringen av antistoffet i fryseren er også en viktig forskjell i antistofflagringsmetoder. For å unngå drastiske endringer i temperatur, legger vekt på noen metoder plassere antistoffet på baksiden av fryseren i motsetning til foran. Dette vanligvis er ment å redusere risikoen for at antistoff mot temperatursvingninger som kan oppstå når fryseren døren kontinuerlig åpnet og lukket.

Alikvoteringsprosessen er også en mulig antistoff lagringsmetode. Størrelsen for en delmengde kan variere, men generelt er mengder mellom 0,507 gram til 0,675 gram (15 til 20 ml). Aliquoter kan bidra til å minimere skade på antistoffet som er et resultat av frysing og tining. Det kan også redusere sjansene for noen forurensning som kan oppstå i prosessen.

Unngå frysing og tining sykluser vanligvis er vektlagt i mange antistoff lagringsmetoder. Dette er fordi endringen i temperatur kan skade antistoffet. Frysing og tining vanligvis kan forekomme en gang i lagringsprosessen, men noe mer kan denaturere antistoffet som, for eksempel, kunne hindre antistoffet fra å binde. Følgelig frostfrie frysere vanligvis ikke er anbefalt for antistoff lagring, da disse kjøleinnretning kan automatisk veksle mellom frysing og tining.

  • Studiet av antistoffer kan være et viktig område i biomedisinsk forskning og utvikling.
  • Lagring av antistoffer riktig kan beskytte dem mot skade.